Innehåll
Seriespädningar används i kemiska och biologiska laboratorier främst för att utföra experiment. De presenteras vanligtvis på logaritmiska skalor eller med multiplar av 10. För det mesta späds bakterier, celler och lösta ämnen för att fungera som kontroller i experimenten. Utspädningar tjänar fortfarande till att ge en hög grad av noggrannhet i dosresponsförsök, där alla prover härrör från samma sats. Dessutom kan de vara nödvändiga för att minska antalet partiklar i ett prov för användning i automatiserad utrustning. Seriespädningar kompletteras genom att ta en liten volym av originalprovet, hälla den i en ny flaska och återföra den till den ursprungliga volymen med den utspädda lösningen. Den allmänna formeln är: initial koncentration / utspädningsfaktor = ny koncentration. I exemplet nedan kommer vi att beräkna en 10 ml seriell utspädning från 2,5x10 ^ 7 celler / ml till 25 celler / ml med en utspädningsfaktor på 100.
Steg 1
Sätt på dig skyddsglasögon och handskar innan du hanterar ämnen.
Steg 2
Märk de tre provrören med krita enligt följande: 2,5 x 10 ^ 5, 2,5 x 10 ^ 3, 25 celler / ml.
Steg 3
Använd formeln (ursprunglig cellkoncentration / utspädningsfaktor = ny koncentration) för att lösa den första utspädningen. Den ursprungliga koncentrationen blir 2,5x10 ^ 7, utspädningsfaktorn 100 och resultatet av den nya koncentrationen i detta steg blir 2,5x10 ^ 5 celler / ml.
Steg 4
Späd originalprovet till 2,5x10 ^ 7 celler / ml med en faktor 100. Ta bort 1 ml av den ursprungliga lösningen med motsvarande pipett och häll i röret märkt "2,5 x 10 ^ 5 celler / ml". Med den andra pipetten, häll ytterligare 99 ml vatten i röret för att slutföra önskad utspädning.
Steg 5
Späd cellerna igen med en annan faktor på 100. Ta bort på samma sätt som tidigare, men nu med 1 ml av 2,5 x 10 ^ 5 celler / ml rör inuti röret märkt "2,5 x 10 ^ 3 celler / ml. ". Tillsätt 99 ml vatten till detta nya rör igen för att slutföra utspädningen, vilket kommer att resultera i 2,5 x 10 ^ 3 celler / ml.
Steg 6
Späd cellerna nu för sista gången. Upprepa samma procedur som innan du häller i röret märkt "25 celler / ml". Tillsätt 99 ml vatten för att slutföra processen och nå önskad utspädning av 25 celler / ml.