Innehåll
Kromatografi används ofta i kemiska laboratorier för att bestämma identiteten på en okänd komponent. Denna komponent flyter genom kolonnomslagningsmaterialet och samverkar med partiklarna. Samspelet mellan partiklarna och komponenterna i provet baseras på attraktionen eller lösligheten mellan dem. Molekyler som inte har någon interaktion med partiklarna i mantelmaterialet får passera genom det utan hinder. Den tid som krävs för att molekylerna ska passera från injektionsstället till systemet vid den maximala toppen av en icke-reaktiv molekyl är kolonnens dödtid.
Steg 1
Förstärk det okända provet med en liten mängd av en förening som inte kvarhålls av kolonnmaterialet. Föreningen passerar genom kolonnen utan att interagera med inslagningsmaterialet i kolonnen.
Steg 2
Ladda sprutan med cirka 20 mikroliter av provet och sätt in sprutanålen i injektionsöppningen. Ladda provslingan från ventilen genom att tömma sprutan i ventilen.
Steg 3
Slå på kromatografinstrumentet och starta mobilfasen. Denna fas strömmar genom instrumentet och tar provet genom kolonnen och detektorn som slutar i en avfallsbehållare.
Steg 4
Aktivera ventilen, vilket gör att provet kan komma in i vätskeflödesvägen. Detta laddar provkomponenterna till toppen av kolumnen och separationen börjar.
Steg 5
Övervaka detektorns sändarsignal och identifiera den första toppen i kromatografen. Skillnaden mellan insprutningstiden och maximalt för den första toppen, representerad av förstärkningskomponenten, är dödtiden.
Steg 6
Mät avståndet mellan insprutningspunkten och den maximala höjden på den första toppen. Multiplicera avståndet med papperets eller axelns hastighet för att hitta dödtiden.