Innehåll
PCR är en metod som används av forskare för att göra miljontals kopior av ett segment av DNA. Polymeraser - en typ av proteinenzym - hjälper till att producera nya segment. Forskare använder ofta Taq-polymeras i PCR.
historia
Taq-polymeras kommer från bakterien Thermus aquaticus, som lever i termiskt vatten. Kary Mullis och Fred Faloona utvecklade PCR i mitten av 1980-talet med ursprungligen Escherichia coli-polymeras, men forskare började snart använda Taq i PCR eftersom det var mer motståndskraftigt mot höga temperaturer.
funktion
PCR innefattar stegen för denaturering, glödgning och replikation, vanligtvis upprepad 20 till 30 gånger. Denaturering separerar DNA-dubbelsträngen i isolerade strängar. I glödgningssteget binder primrarna till DNA-segmenten som skall kopieras. Taq-polymeras börjar arbeta på replikationssteget: polymeras monteras, från varje enskild DNA-sträng markerad av en primer, en ny dubbelsträng.
fördelar
De höga temperaturer som erfordras för att denaturera DNA förstörde E. coli-polymeraset som ursprungligen användes i PCR, vilket krävde tillsatsen av ytterligare enzym till varje cykel. Taq-polymeras kan motstå dessa temperaturer, så forskare kan nu göra flera PCR-cykler automatiskt.
överväganden
Taq-polymeras har en relativt hög DNA-dubblingsfelhastighet. Andra polymeraser som är stabila vid höga temperaturer har lägre felhastigheter, men Taq är fortfarande den mest använda på grund av dess tillförlitlighet och mångsidighet.