Innehåll
- vägbeskrivning
- Förbereda materialet
- Placerar sporerna på plattorna
- Isolering av en ren kultur
- Förberedelse av avkommor
- Inokulering av substratet för svamptillväxt
- tips
- varning
- Vad du behöver
Svampar kan odlas från sporer eller vävnadsodling. Spore kulturer resulterar i populationer av genetiskt olika svampar. Det är användbart när man isolerar och testar nya stammar. Procedurer för utveckling av svamp är artsspecifika. Det antas att producenten vet hur man odlar en svamp av intresse, i synnerhet när tillräckligt många avkommor har uppnåtts.
vägbeskrivning
En samling av Agaricus svampar (Bilder av Ian Grant, Jason Hollinger)-
Förbered 500 till 1000 ml MEA enligt tillverkarens instruktioner.
-
Placera natriumkloridlösningen i provrören och MEA i Erlenmeyer-kolvarna. Fyll inte rör och flaskor mer än halvvägs och täck lite.
-
Sterilisera lösningen av natriumklorid, MEA och Petri diskar (om inte steril) i en tryckkokare vid 121 grader Celsius och 1 atm i 15 till 20 minuter.
-
Ta bort MEA, natriumkloridlösningen och petriskålarna från tryckkokaren och låt svalna.
-
När MEA har kylts tillräckligt för att hanteras, men innan du stelnar, lyfter du locket av varje petriskål noggrant och häll 10-20 ml smält MEA.
-
Låt MEA och natriumkloridplattorna svalna till rumstemperatur.
Förbereda materialet
-
Sterilisera kroken i en alkohollampa. Låt tråden varma tills den blir röd och låt den svalna i 5 sekunder.
-
Doppa kroken i natriumkloridlösningen för att samla en droppe vätska. Sprid droppen över ett litet område i spårets intryck (eller annan sporekälla) för att skapa en flytande / sporblandning. Upprepa denna process flera gånger, sterilisera kroken mellan var och en.
-
Doppa kroken i suspensionen av natriumklorid och sporer för att samla sporer.
-
Lyft locket på agarplattan tillräckligt för att få tillgång till kroken.
-
Spread suspensionen från kroken på agarytan och ta plattan igen. Upprepa så många kort som du vill (minst fem eller sex).
-
Stäng agarplattorna med plastfolie för att förhindra torrhet. Inkubera sporerna vid lämplig temperatur och ljusförhållanden för arten.
-
Observera tecknen om några dagar, letar efter tecken på spiring. En vit fluffig tillväxt (ett mycelium) på agarytan indikerar närvaron av en svamp (men kan inte vara en svamp som har vuxit från sporerna).
Odlar svampar från sporer
Placerar sporerna på plattorna
-
Jämför myceliet med publicerade beskrivningar av myceliet du försöker växa.
-
Om myceliet ser ut som förväntat, rena kulturen genom att klippa ut bitar och överföra dem till färska agarplattor.
-
Fortsätt att skära bitar från toppen av de växande kolonierna, tills en ren koloni är fri från bakterier.
Isolering av en ren kultur
-
Skär och överför bitar av renat mycelium till steriliserade fiberburkar eller substrat av träflis. Den typ av substrat som används beror på svamparter.
-
Inkubera huvudmyceliet under betingelser som är lämpliga för arten tills substratet fullständigt koloniseras med myceli.
-
Skaka myceliens behållare periodiskt för att fragmentera substratet och påskynda koloniseringen.
-
Använd huvudmyceliet för att ympa andra behållare och producera mer myceli.
Förberedelse av avkommor
-
Skaka myceliens behållare kraftigt för att fragmentera dem.
-
Placera myceliet i påsar eller substratbrickor för svamptillväxt.
-
Blanda försiktigt myceliet på substratet, omrör eller omrör.
-
Fortsätt enligt publicerade metoder för hur man odlar myceliet och börja fruktprocessen av arten som odlas.
Inokulering av substratet för svamptillväxt
tips
- Arbeta snabbt när man häller agaret eller överför inokulatet för att minska förorening.
- Tid och ansträngning kan sparas genom att köpa sterila och förberedda agarplattor.
- MEA är ett bra allmänt medium för odling av svamp, men en annan typ av medium kan vara lämpligare beroende på arten.
varning
- Tryckkokare kan bli heta och orsaka skador. Följ tillverkarens underhålls- och bruksanvisning.
- Steriliserade behållare är heta och måste hanteras med värmebeständiga handskar för att förhindra brännskador och spill.
- Låt behållarens lock steriliseras lös, så att trycket kan jämföras under uppvärmnings- och kylprocessen.
- Alla behållare som ska steriliseras måste vara tillverkade av autoklaverbart material.
Vad du behöver
- Svampsporer
- Malt extrakt agar (MEA)
- Petriskålar (tallrikar)
- Substrat lämpligt för arter
- Alkohollampa
- Inokulering Hook
- Natriumkloridlösning (0,9% vikt / volym)
- Tryckkokare
- Testa rör
- Erlenmeyer kolvar
- Plastfilm
- Fartyg eller påsar för framställning av myceli